Fundamentos Básicos de Microscopia: Teoria e Prática no seu Projeto

Disciplina Opcional

Dados da disciplina

Código: BMQ810

Carga horária: 60 horas

Período: 04/05/2020 a 29/05/2020

Horário: 13:00 às 17:00 - segunda a sexta

Vagas: 06

Descrição

1ª Semana: Aulas teóricas


Segunda: Funcionamento básico do microscópio de luz – Como a imagem é formada

1. Radiação eletromagnética, lentes e formação da imagem.

2. Conceito de abertura numérica e sua importância na formação da imagem e resolução.

3. Campo claro x contraste de fase x contraste interferencial (DIC) x campo escuro.

4. Alinhamento, cuidados básicos e manutenção do microscópio.


Terça: Microscopia de fluorescência

1. Epifluorescência.

2. Confocal/ Apotome/ Spinning disc.

3. Probes e filtros.


Quarta: Processamento digital de imagens

1. Parâmetros básicos de resolução (TIFF x JPEG, 8 bits x 16 bits, etc.).

2. Ajustes de intensidade.

3. Eticamente, o que eu posso mexer numa imagem antes de publicar?

4. Como montar uma imagem final no Photoshop.


Quinta: Funcionamento básico do microscópio eletrônico de transmissão e varredura

1. Elétrons e lentes eletromagnéticas.

2. Formação da imagem no microscópio eletrônico de transmissão.

3. Formação da imagem no microscópio eletrônico de varredura.

4. Preparo de amostras para microscopia eletrônica.


Sexta: Métodos/técnicas comuns e avançadas

1. Fixação de amostras biológicas.

2. Imunolocalizações: pre-embbedding, post-embbedding, cuidados com a fixação, cortes congelados, co-localizações, etc.

3. Morfometria/ Quantificações de intensidade.

4. Microscopia eletrônica: microanálise de raios-X, tomografia, FIB-SEM, SFB-SEM.


2ª Semana: Discussão dos projetos e desenho dos experimentos


1. Em cada dia da semana um dos alunos apresenta seu projeto e a pergunta que se espera ser respondida por microscopia.

2. Discutir para cada caso qual seria a melhor técnica a ser utilizada e montar, em grupo, em cada um dos experimentos.

Requisitos

Precisar fazer algum experimento de microscopia para compor a dissertação ou tese.

Estrutura do Curso

Aulas Teóricas e Aulas Práticas.

Forma de Avaliação

1. Relatório final com o racional e justificativa para a escolha do experimento que foi realizado e análise dos resultados obtidos por cada aluno.

2. Presença será cobrada para a avaliação.

Bibliografia

1. Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K. and Walter, P. (2002). Molecular Biology of the Cell. New York: Garland science.

2. Meek, G. A. (1976). Practical Electron microscopy for biologists.

3. Murphy, D. B. (2001). Fundamentals of light microscopy and electronic imaging. New York, USA: Wiley-Liss.

4. Old Woking, Great Britain: Wiley and sons Ltd.

Arquivos